在進行非臨床安全（quán）性評價中，實驗動物（wù）常被用於（yú）了解靶器官毒性作用特征、劑量依賴（lài）性、與暴露量的關係以及潛在的可逆性（如適用）等實（shí）驗中。所得信息將被用於估算人體試驗的初始安全劑量和範圍，並確定臨（lín）床（chuáng）監測潛在不良反應的參數。而非臨床安全評價中（zhōng）的一個重要方麵就是檢測受試物（wù）對（duì）動物生（shēng）殖係統的（de）影響，這些研究（jiū）通常在（zài）齧齒類動物和兔上進行。然（rán）而，對於許多生物藥品而言，齧齒類動物和兔往往觀察不到與人類相當的藥理學活性，則需（xū）使用非人靈（líng）長類動（dòng）物（NHP）來進行測試。而對於這類評價，需要（yào）求動物達（dá）到性成熟（shú），那如何來證（zhèng）明或者確認非人靈長類動物已經達到性成熟（shú）呢？

藥物安全性評（píng）估中最常（cháng）用的NHP品係是食蟹猴（Macaca fascicularis）。食蟹猴最早生（shēng）活於赤道附近，該地區沒（méi）有明顯的夏季和冬季，因此，它們一年四季都可以有活躍的的性（xìng）活（huó）動。此外，自然棲息於巴西的狨猴（Callithrix jacchus），偶爾也（yě）被用作生殖方（fāng）麵（miàn）研究，但它（tā）們在預測潛在（zài）的睾丸或類固醇激素相關（guān）內分泌（mì）效應方麵的價值有限。而恒（héng）河猴（Macaca mulatta）很少用（yòng）於（yú）生殖安全性研究，原因之一是其生育力（lì）具有明顯的季節性，並（bìng）且（qiě）生殖功能有約半年的時間都比（bǐ）較弱。因此（cǐ）本文（wén）將主要介紹食蟹猴的性成熟判定。

壹、雄性食蟹猴的性成熟

總體而言，食蟹猴（hóu）的性成熟開始時間很難預測，並且（qiě）個體差異較大（dà）。一般（bān）認（rèn）為來自毛裏求斯的（de）食蟹猴似乎比來（lái）自（zì）亞洲的食蟹猴更早成熟。

雄性食蟹猴的性成熟可以通過精子生成來判定，精子（zǐ）生（shēng）成通常發生在骨（gǔ）骺閉（bì）合之前。精子生成的完成可以通過精液（yè）樣本中存在精（jīng）子來證明，這也（yě）是雄性性（xìng）成熟的推薦功能參（cān）數。射精的能（néng）力和（hé）精子的（de）存在象征著整個雄性生殖係統完全成熟。

除了通過精液樣本來判斷以外（wài），年齡、體重或睾丸體（tǐ）積也可（kě）作為替代的判定指標。5歲5個月且體重（chóng）5.3 kg 以上的動（dòng）物被認（rèn）為與其睾丸成熟有90%的相關性。睾丸體積超過10mL 也能預示性成熟。用於測定睾丸體（tǐ）積的方法很重要。有研究表明，超聲測（cè）量（liàng）比（bǐ）遊標卡尺測量更準確。此外，睾丸重量（liàng）在20g 以上也是睾丸成熟度的良好（hǎo）指（zhǐ）標。雄性（xìng）附屬生殖器官的（de）成熟與睾丸成熟直接相關。當睾丸功能發育完全（quán），即產生精子和（hé）睾酮時，這些器官就發育完全。組織（zhī）學上，如果在（zài）曲細精管中觀察到完整的精子發生，並且在附睾中發現中等或大量的精子，則認為睾丸完（wán）全成熟。

促黃體激素（LH）、促卵泡素（sù）（FSH）、睾酮或抑製素B等激素的單次測量不是性成熟的可靠生物標誌物。因為激素的分泌敏感性高，半衰期短，因此自體不同時（shí）期（qī）和個（gè）體間變（biàn）異性較大，不（bú）過睾酮水（shuǐ）平高於20nmol/L通常可反映（yìng）食蟹猴的性成熟。

貳、雌性食蟹猴的性成熟

雌性食蟹猴性（xìng）成熟最常見於至少4歲、體重至少（shǎo）2.5公斤的（de）動（dòng）物，但與雄性一樣，存在一些不確定性。確認雌性食蟹猴性成熟最可靠的方法是通過評估月經出（chū）血（xuè）。食蟹猴卵巢周期（月經周期（qī））的整個持續時（shí）間為（wéi）30（+5）天，月經出血發生時間為1-8 天（tiān），平均4（+1）天。但當單獨飼養時，隻有約50%的動物表現出（chū）規則的月經周（zhōu）期。而當合籠飼（sì）養時，高達80%的動物可出現規律的月經周期。值得注意的是（shì），雌性食蟹猴在（zài）一起圈養時，月經周期並不會同步（bù）。

雌性月經可以通過（guò）每天采集陰道拭子來監測，當監測到2天及以上出血，並且至少間隔20天（tiān）後能夠（gòu）再次監測到出血時，說明動物達到性成熟水平。由於動物出血時間可能較短，因此建（jiàn）議堅（jiān）持每天采集陰（yīn）道拭子，而不是間隔2-3天采集，不然很容易錯過（guò）月經期。而評估會陰（yīn）部皮膚腫脹（zhàng）和皮（pí）膚發紅並不是監測月經周期性（xìng）的可靠指標。原則上，也可以通過測量血清（qīng）中（zhōng）黃體（tǐ）酮、17-B-雌二醇、LH 和 FSH的濃度來監測（cè）卵巢活動周期，但是需要頻繁采血。因此，不建議僅通過（guò）激素分析的方式（shì）評估性成熟程（chéng）度。

由此可（kě）見，評判（pàn）食（shí）蟹猴是否性成熟是一個綜合的指標（biāo）評價，不可僅（jǐn）靠單一的現（xiàn）象或因素來決定，使用這樣的方法更科（kē）學，從而才能使非臨（lín）床安全（quán）評價獲得的結（jié）果更可靠，更有價值。

參考文獻：

Mecklenburg, Lars., C. M. Luetiens, and G. F. Weinbauer.Toxicologic Pathology Forum*： Opinion on Sexual Maturity and Fertility Assessment in Long-tailed Macaques (Macaca fascicularis) in Nonclinical Safety Studies[J].Toxicologic pathology, 2019, 47(4):444-460.