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大(dà)鼠麻醉指導原則
目的
本文旨在提供一般建議,該建議並不意味著其包含所(suǒ)有適用於大鼠的麻醉用藥物及其組合,具體的麻醉方案應(yīng)根據(jù)特定情況和研究需求與所在機構的獸(shòu)醫合作製定。麻醉使動物完全或部分失去感覺,過程中伴隨或不伴隨意識喪失。在動物手術、可能引起疼痛(tòng)的非手術操作及需要固定動物的非疼痛操作(zuò)等情景下都有可能實(shí)施麻(má)醉操作。在麻醉前、麻醉過(guò)程中(zhōng)和麻醉後,必須采取措施確保動物的(de)健(jiàn)康和麻醉的有效性。麻醉可通過胃腸外給藥或吸入給藥(yào)的方(fāng)式進行。藥物的選擇取決於具體操作、研究目的和動物年齡等其他因(yīn)素。如對藥物選擇有疑問,請谘詢所在機構的獸醫。
一般原則和注意事項
• 適應期(qī):建議所有動物在運輸後適應一周,以防止應激引起的反應。動物至少需要72小時才能恢複到基本生理狀態。
• 禁食:由(yóu)於大鼠無(wú)法嘔吐,通常麻醉前無需禁食。然(rán)而,如需禁食(shí)(例如為了保持體重),因大鼠的高代謝率,禁食時間不(bú)應超過2-3小時。請注意,切勿限(xiàn)製飲水。
• 眼睛保(bǎo)護:在麻醉狀態下,大鼠的眼睛會持續睜開,可能導致角膜幹燥和損傷。因(yīn)此,在如下條件下,應塗抹(mò)眼膏來保護眼睛。
○ 麻醉持續時間超過 5 min;
○ 通過麵罩進行麻醉(zuì);
• 監護:無論(lùn)使(shǐ)用何種麻醉劑,均應監測麻醉(zuì)狀(zhuàng)態下的(de)大鼠,以確保(bǎo)心髒和呼吸(xī)功能不被過度抑製,以及麻醉深度適當。
無專用設備(bèi)時,可監測以下參數:
○ 麻醉深度:通過掐指檢查;
○ 呼吸頻率和模式:正常未受幹擾(rǎo)的呼吸率(lǜ)約為 70-120 bpm,麻醉期間可接受 50% 的(de)緩慢下降速率;
○ 粘膜顏色:應為粉紅色而(ér)非藍(lán)色或灰色;
○ 體溫:可使用直腸溫度計監測體溫,體溫應保持在(zài) 35.8-37.5 ℃之(zhī)間 ;
○ 血氧(yǎng)飽(bǎo)和(hé)度和心(xīn)率:可用專用的齧齒類動物脈搏式血(xuè)氧儀(yí)監測血氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-550 bpm);
○ 如對監護或監護設備有任何問(wèn)題,請與所在機構的(de)獸醫聯係。
• 保溫(wēn):所有種屬在麻醉狀態(tài)下均存(cún)在低體(tǐ)溫的風險。由於大(dà)鼠體表麵積(jī)與體重比高,尤其易受影響。低體溫對動物(wù)會產生顯著的生理應激,可能延長恢複(fù)時間並有潛在致命風險。
○ 在所有麻醉過程中提供額外的(de)保(bǎo)溫措施(shī)。
○ 補充熱源包括循環水毯、電熱墊(diàn)和可在微波或(huò)水浴中加熱的(de)市售產品(pǐn)(如等溫(wēn)墊或凝膠加熱器)。
○ 切勿(wù)直(zhí)接將動物放(fàng)在熱源上。
○ 如對使用或購(gòu)買(mǎi)額外的保溫(wēn)來源有疑問(wèn),請與您(nín)所在(zài)機構的獸醫聯係。
• 補液:在麻醉時間較長或動物患病、老年或虛弱的情況下,可考慮(lǜ)皮下或腹(fù)腔注射溫熱的液體。更多信息請(qǐng)谘詢(xún)您的獸醫。
• 恢(huī)複:持續(xù)監測動物至其完全恢複。
○ 在幹淨的籠子裏,將動(dòng)物放在紙巾上(不使用墊料(liào)),以最大程度地減少氣管阻塞或肺炎的風險。
○ 麻醉後的動物(wù)單獨放在一個(gè)籠子裏進(jìn)行恢複。
○ 恢複期間繼續保溫。
○ 當動物能走動時,將其送回原(yuán)籠(lóng)中子,並提供飼料和水。
○ 根(gēn)據所(suǒ)進行的手術,為了避免同(tóng)籠夥伴啃縫線(xiàn)或切口處的創傷,大鼠可能(néng)需要在術後階段單獨飼養。任(rèn)何單(dān)籠飼養的計劃(huá)都應包(bāo)括在IACUC方案(àn)中,以便進行審查和批準。
麻醉藥物和操作
• 吸入麻(má)醉劑: 異氟(fú)烷是首(shǒu)選的吸入麻醉劑。 起效快、恢(huī)複可靠。
A. 吸入麻醉可以通過滴瓶法、誘(yòu)導室、麵罩或氣管插管使用精(jīng)密蒸汽器進行。
i. 滴瓶法:
a.請勿使大鼠直接接觸液體(tǐ)吸入麻醉劑(可通過在棉花或紗布上放置不(bú)可滲透的網格來實現)。
b. 由(yóu)於無法控製室內的(de)麻醉劑濃度,並且濃度可能迅速達到有毒水平,因此該方法僅適用(yòng)於非常短的手術,如皮下腫瘤植入或麵罩麻醉前的誘導。
ii. 誘導室、麵罩(zhào)和氣管插(chā)管:
a. 這些需要配備氧(yǎng)氣源和精密(mì)蒸發器的氣體麻醉機。一些研究單位可能使用室內空氣而(ér)不是純氧作為(wéi)氣源,這也是可接受的。
b. 蒸發器必須與特定的(de)吸入麻醉劑兼容。
c. 由於大鼠呼吸能力較小,使(shǐ)用非循環呼吸係統。
iii. 當使用吸入性麻醉時,使用通風櫃或配備氣體清除係統的麻(má)醉係統,以盡量(liàng)減少職業暴露於排出氣體。
B. 注射麻醉(zuì)劑:氯胺酮(tóng)/賽拉嗪聯(lián)合使用是大鼠的首選注射麻醉劑。
下麵列出了其他常用的注射劑。
i. 大鼠對各種麻醉藥的(de)敏感性差異顯著。 年(nián)齡、體(tǐ)質、品係、健康狀(zhuàng)況、基因調控和性別等因素都可能(néng)影響麻醉敏感性。以下劑量僅為(wéi)一般指導原則,基於上述因素可能存在顯著差異。在您的方案(àn)中添加麻醉劑時,建議提供一個(gè)範圍,以允許根(gēn)據每隻動物的特定需求進行給藥(yào)。
ii. 不建議在(zài)大(dà)鼠中進行肌肉注射(IM),因為可(kě)能導致組織刺激、跛行和自殘等並發症。
*一個(gè)很好的初(chū)始方案是 100 mg/kg 氯胺酮和(hé) 7 mg/kg 塞拉嗪。
**阿替帕唑(5 mg/ml)的濃度是右美托咪定(0.5 mg/ml)的10倍。逆轉右美托咪定,阿替帕唑的體積需是右美托咪定的4~6倍。但是,如果右美托咪定的給藥體(tǐ)積和(hé)阿替帕唑相同,此時阿替帕唑的體積會是右美托咪定(dìng)的10倍。由於阿替帕唑(zuò)的安全邊際高,所以這樣(yàng)做也是安全的。緊急情況下,可以采用這一(yī)體積進行逆(nì)轉,無需計算確切劑量。
同樣(yàng),使(shǐ)用與塞拉嗪(20 mg/mL)等體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉也有效。雖然塞拉嗪具有更高的濃度(20 mg/mL),但阿替美唑(5 mg/mL)更純淨,且與α2 受體結合更緊密,因此等體積逆轉塞拉嗪也可行。
提醒:鑒於國內某些廠家供應的賽拉嗪存在濃度跟包裝不(bú)匹配問題,以(yǐ)及質量可能存在不穩定問(wèn)題,請谘(zī)詢機構獸醫後(hòu)再使用。
C.注射麻醉劑的一種類型是(shì)局部麻醉劑(jì)。
i. 局麻藥(yào)通過特異性結合(hé)神經細胞(bāo)膜上的電壓(yā)門控 Na+ 通(tōng)道來阻斷神經衝動。
ii. 給藥途徑包括粘(zhān)膜(mó)(鼻、眼等(děng))局部給藥或(huò)直接注射到組織和神經束周圍。
iii. 在疼痛(tòng)刺激(如切口)之前給予局部麻醉劑被認為是(shì)輔助鎮痛藥物,與阿片(piàn)類和非甾體抗炎藥(NSAID)一起使用。
iv. 由於持續時間較短(數小時),不鼓勵將局部麻醉劑作為主要鎮痛藥物使(shǐ)用(yòng)。